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反相液相色譜柱分配色譜
  • 更新日期:2015-07-28     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):2778
    • 反相液相色譜柱色譜法的基本原理 
      利用樣品混合物中各組分理、化性質(zhì)的差異,各組分程度不同的分配到互不相溶的兩相中。當兩相相對運動時,各組分在兩相中反復(fù)多次重新分配,結(jié)果使混合物得到分離。 
       
      反相液相色譜柱分配色譜
      原理:固定液機械的吸附在惰性載體上,樣品分子依據(jù)他們在流動相和固定相間的溶解度不同,分別進入兩相分配而實現(xiàn)分離。
      固定相:將一種極性或非極性固定液吸附在惰性固相載體上。如全多孔微粒硅膠吸附劑。
      根據(jù)極性不同分類:正相分配色譜—固定相載體上涂布的是極性固定液;
      流動相是非極性溶劑;
      可分立極性較強的水溶性樣品;
      弱極性組分先洗脫出來。 反相分配色譜—固定相載體上涂布的是非極性或弱極性固定液;
      流動相是極性溶劑;
      強極性組分先洗脫出來。
      液-液分配色譜固定相中的固定液體往往容易溶解到流動相中去,所以重現(xiàn)性很差,且不能進行梯度洗脫,已經(jīng)不大為人們所采用。
       
      反相液相色譜柱的填料常是以硅膠為基質(zhì),表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。
      樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組份zui先被沖洗出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。
       

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